Jane Lynch đã tham gia nhiều bộ phim chẳng hạn như iCarly, một chương trình dành cho thiếu nhi của Mỹ. Jane đóng vai mẹ của Sam. Bà cũng lồng tiếng cho nhân vật Trung sĩ Calhoun trong bộ phim hoạt hình Wreck-It Ralph của Disney.

Jane dành 15 năm ở Chicago để làm việc tại Steppenwolf Theatre Company và là một trong số hai người phụ nữ được chọn tham gia vào The Second City.[6][10] Sau đó bà tiếp tục rèn luyện các kỹ năng của mình tại Nhà hát Annoyance với vai diễn Carol Brady trong vở The Real Live Brady Bunch. Bà và Andy Richter, người thủ vai Mike Brady trong các buổi diễn ở New York, đã trở thành bạn thân với nhau.[11]

Điện ảnh

Bộ phim điện ảnh đầu tiên mà Jane tham gia là Vice Versa năm 1988. Năm 1993, bà cùng Harrison Ford xuất hiện trong The Fugitive.

Trong những năm 1990, bà góp mặt trong nhiều phim quảng cáo, trong đó có Frosted Flakes do Christopher Guest đạo diễn. Sau đó Jane thủ vai Christy Cummings trong Best in Show (2000). Từ đó bà tham gia vào nhiều phim của Christopher như A Mighty Wind (2003) và For Your Consideration (2006).

Khán giả và giới phê bình chú ý đến Jane qua vai diễn của bà trong The 40-Year-Old Virgin của Judd Apatow. Bà tiết lộ với Terry Gross của Fresh Air rằng ban đầu vai diễn này dành cho nam, nhưng do vợ của Steve Carell, Nancy Walls, thúc dục, mà được trao cho Jane.[12] Từ đó Jane đảm nhận nhiều vai phụ trong một loạt các bộ phim bao gồm Role Models, Talladega Nights: The Ballad of Ricky Bobby, Alvin & the Chipmunks, Walk Hard: The Dewey Cox Story, Space Chimps, The Rocker, The Hammer, Another Cinderella Story, Ice Age: Dawn of the Dinosaurs và Spring Breakdown.[13]

Trong Adventures of Power, một bộ phim hài được đánh giá cao ra mắt năm 2008, Jane gặp lại bạn diễn For Your Consideration Michael McKean trong vai Dì Joanie cùng với Ari Gold, Adrian Grenier, Chiu Chi Ling và Shoshannah Stern.

Trong Julie and Julia, bà thủ vai Dorothy McWilliams, chị gái của Julia Child. Entertainment Weekly dành một bài viết trên trang web của mình để viết về khả năng bà được đề cử cho giải Oscar.[14][15]

Truyền hình

Jane đã góp mặt trong nhiều phim truyền hình trong hơn một thập kỷ, trong đó có L.A. Law, Judging Amy, The West Wing, 7th Heaven, Desperate Housewives, Friends, Dawson's Creek, Felicity, Arrested Development, Lovespring International, Two and a Half Men, Weeds, Boston Legal, The L Word, Criminal Minds, Help Me Help You, Gilmore Girls, The New Adventures of Old Christine, Psych, Monkvà Party Down. Bà cũng cùng John Hannah và William Fichtner tham gia MDs năm 2002, cũng như xuất hiện trong Criminal Minds với vai bà mẹ bị tâm thần phân liệt của Spencer Reid.

Đầu năm 2009, Jane tham gia sê ri phim truyền hình Glee của Fox và nhận được rất nhiều lời khen ngợi cho vai diễn Sue Sylvester của mình. Mary McNamara của tờ LA Times viết, "Một mình Jane là đủ làm cho Glee đáng xem."[16] Trước đó, bà là diễn viên chính trong sê ri phim hài Party Down của Starz. Mặc dù phim đã chuyển sang mùa thứ hai, Jane sẽ không tiếp tục tham gia do vai diễn của bà trong Glee.[17]

Bên cạnh đó, Jane tiếp tục theo đuổi nhiều dự án khác. Bà dẫn chương trình cho Saturday Night Live vào ngày 9 tháng 10 năm 2010; thông tin này được báo cho bà biết một cách tình cờ bởi tác giả của Glee Ryan Murphy thông qua tin nhắn điện thoại.[18] Jane cũng xuất hiện với tư cách khách mời trong phim iCarly của Nickelodeon với vai mẹ của Sam Puckett (tập "iSam's Mom").